用挫刀或镊子颈部轻叩一下

发布时间:2019-11-27    作者:未知

  5、取0.1-0.2ml之菌体悬浮液于指定的平板培育基上,做划线分手培育或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒平均涂抹,以查验菌种之纯度及活化景象,而残剩的菌体则全数移入指定的液体培育基内,并依指定的温度培育之。

  潘峰,刘鹍鹏,时蕾,等.umu试验菌种保留前提优化研究[J].污染取防治,2008,30(10).

  2、灼烧接种环,待数秒冷却后,扭转培育基自I区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域(II区)。

  1、手持金属接种环,用酒精灯将接种环(共约5公分)烧至火红,并不竭来回烧烤金属固定杆之前约10公分,期待约10秒钟,将接种环前端轻触培育基边缘凝胶(无菌体部份),待接种环完全冷却后,以环沾黏菌滴,由培育基边缘向地方悄悄横划紧接的并行线培育基为止(I区)。

  菌种活化就是将保藏形态的菌种放入适宜的培育基中培育,逐级扩大培育获得纯而壮的培育物,即获得活力兴旺的、接种数量脚够的培育物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,由于保留时的前提往往和培育时的前提不不异,所以要活化,让菌种逐步顺应培育。

  6、液氮超低温冻结法保留菌种苏醒取-80℃冰箱冻结法保留菌种苏醒类似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应当即放置正在38℃-40℃水浴中快速苏醒并恰当摇动。曲到内部结冰全数消融为止,一般约需50秒-100秒。安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培育基长进行培育。

  要大白菌种活化的环境就需要领会菌种保藏体例和方式。国际国内常用的菌种保留方式包罗:按期移植法、液体白腊法、沙土管法、线℃冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。

  4、察看第2代能否具有典型的菌落形态,然后挑取单一的纯菌落,进行革兰染色、镜检,察看其染色特征及菌体形态,并进一步做生化判定尝试以确定菌种。第三代为工感化菌。

  平板划线分手法是指把稠浊正在一路的微生物或统一微生物群体中的分歧细胞用接种环正在平板培育基概况通过度区划线稀释而获得较多分布的单个细胞,经培育后发展繁衍成单菌落,凡是把这种单菌落当做待分手微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁衍而来的,故必需频频分手多次才可获得纯种。其道理是将微生物样品正在固体培育基概况多次做“由点到线”稀释而达到分手目标的。

  6、某些菌种颠末冷冻干燥保留后,迟畅期(lagperiod)较长,必需等培育二倍时间后才能长出,且再颠末一、二次继代培育(Subculture)后才能一般发展。颠末以上的勤奋后仍培育失败,才视为不克不及活化。

  付美红,王耀耀,朱研研,等.微生物菌种的保藏方式[J].化工,2010,33(4):33-34.

  4、(a)合用于细菌用无菌吸管,吸收0.3-0.5ml指定之液体培育基,滴入内管内,并轻细震动(可用该吸管协帮),曲到平均悬浮。(b)合用于霉菌、酵母菌用无菌吸管,吸收0.3-0.5ml无菌水,滴入内管内,待干燥粉末消融后,以无菌吸管吸收并滴入约含有5ml无菌水之试管内,轻细震动使其平均后,静置30至60分钟。

  3、沙土管法保留菌种正在苏醒时,正在无菌前提下打开沙土管,取部门沙土粒于适宜的斜面培育基上,长出菌掉队再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培育基中,增殖培育后再转接斜面。

  4、挑选培育基健壮的菌落,挑选此中部门菌落接种到新的培育基中培育,反复此步调2-3次,从而获得发展优良的菌落培育基:LB培育基,对于含有质粒的菌种能够正在活化培育后,接种到含有抗生素的平板上,进行筛选,然后将长出的菌落接种到斜面或者平板上保留。

  1、正在无菌操做下,用无菌微量吸管,从已消融的管中吸收50μL(或1-2滴)的菌液,滴入固态指定培育基(培育基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近,以划线、将接种好的培育基置于指定温度的培育箱中培育。

  5、-80℃冰箱冻结法保留菌种苏醒时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应当即放置38℃-40℃水浴中快速苏醒并恰当快速摇动。曲到内部结冰全数消融为止,约需50秒-100秒。安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培育基长进行培育

  3、正在无菌下,以沾有75%酒精的棉花擦拭外管,正在火焰上加热外管之尖端。滴数滴无菌水于加热处,使外管分裂,再以硬棒敲破尖端。取出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。

  用无菌棉签沾冷水,正在顶部擦一圈,顶部呈现裂纹,ued体育网址,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培育液消融菌块,利用无菌吸管移入新颖培育基上,进行适温培育。

  李铁元,张平之. 菌种培育手艺(五) 第五讲 菌种的退化、复壮及保藏[J].食物科学,1986,6.

  7、若菌种未能活化,或活化之菌落有疑问时,请于收到菌种之一个月内,以问题菌株反映单传实至本核心,即进行处置。

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  把微生物从保藏斜面转接到活化斜面上,使其活性得以恢复,相对而言活化斜面培育基中的养分更丰硕些,从而使微生物活性恢复的同时恢复其优秀的出产机能。

  2、液体白腊法保留的菌种正在苏醒时,挑取少量菌体转接正在适宜的新颖培育基上,发展繁衍后,再从头转接一次。